Articulo de PCR en Hipertensión Arterial

Tema: Regiones polimórficas del gen 11ßHSD1 en hipertensión arterial

Objetivo: Obtener los polimorfismos CAI5, CAI9 y InsA83557 mediante la amplificación del gen11ßHSD1 por PCR.

Muestra: Sangre de pacientes.

Extracción del ADN: Se aisló el ADN genómico a partir de leucocitos de sangre periférica de pacientes y mediante el kit DNA-zol (Invitrogen, USA).

Gen a amplificar: gen 11ß-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 1 (11ßHSD1).

Tipo de PCR: PCR tiempo real

Desnaturalización inicial:  94°C durante 2 min

Desnaturalización:  94°C durante 30 s

Hibridación:  55°C durante 30 s

Extensión:  72°C durante 30 s

Extensión final: durante 10 min a 72°C

Número de ciclos: 30 ciclos

Visualización: Electroforesis en un gel de poliacrilamida al 8% durante 4 h a 150 volts constantes

Producto de amplificación de los polimorfismos del gen 11ßHSD1

CAI5: 201 pb

CAI9: 308 pb

InsA83557: 282 pb

Bibliografia.

• http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0034-98872008000600003&script=sci_arttext