Tema: Regiones polimórficas del gen 11ßHSD1 en hipertensión arterial
Objetivo: Obtener los polimorfismos CAI5, CAI9 y InsA83557
mediante la amplificación del gen11ßHSD1 por PCR.
Muestra: Sangre de pacientes.
Extracción del ADN: Se aisló el ADN genómico a partir de leucocitos
de sangre periférica de pacientes y mediante el kit DNA-zol (Invitrogen, USA).
Gen a amplificar: gen 11ß-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 1
(11ßHSD1).
Tipo de PCR: PCR tiempo real
Desnaturalización inicial: 94°C durante 2 min
Desnaturalización: 94°C durante 30 s
Hibridación: 55°C durante 30 s
Extensión: 72°C durante 30 s
Extensión final: durante 10 min a 72°C
Número de ciclos: 30 ciclos
Visualización: Electroforesis en un gel de poliacrilamida
al 8% durante 4 h a 150 volts constantes
Producto de amplificación de los polimorfismos del gen 11ßHSD1
CAI5: 201 pb
CAI9: 308 pb
InsA83557: 282 pb
Bibliografia.